栉孔扇贝消化盲囊亚细胞组分分离与鉴定技术

采用匀浆、差速离心、镜检和标志酶测定等方法,研究了栉孔扇贝(Chlamys farreri)消化盲囊亚细胞组分分离与鉴定技术。结果显示,经Hoechst33258染色,在匀浆2min对照组中,观察到大量栉孔扇贝消化盲囊完整细胞,呈圆形或椭圆形,细胞膜完整,荧光强度较高;在匀浆3、4、5 min实验组中,完整细胞数目逐渐减少,且出现许多形态较小、荧光强度弱、轮廓模糊的细胞碎片。通过血球计数板法得到的细胞破碎结果与上述染色结果一致,随着匀浆时间(2~5 min)的增加,细胞破碎率升高,当匀浆时间达到5 min时,细胞破碎率升至94.24%。利用Hoechst 33258染色栉孔扇贝消化盲囊亚细胞分离组分(S2、C2、C4、S5和C5),镜检发现,C2组分荧光强度最强,荧光颗粒数目多,而其他组分荧光强度弱,且基本观察不到荧光颗粒。由此推测,细胞核主要存在于C2组分中;同时,细胞膜(5’-核苷酸酶)、线粒体(琥珀酸脱氢酶)、细胞质(乳酸脱氢酶)和微粒体(葡萄糖-6-磷酸酶)标志酶活力在其他亚细胞组分中有少量检出,但它们在S2、C4、S5和C5组分中的的标志酶活性比例较高(分别为63.90%、64.89%、77.82%和67.55%)。由此推测,S2、C2、C4、S5和C5分离组分分别为细胞膜、细胞核、细胞质、线粒体和微粒体。本研究成功构建了栉孔扇贝消化盲囊亚细胞组分分离与鉴定技术方法,为贝类生理机制研究提供技术支持。     

Research Progress on the Development of Mammary Glands

Mammary gland is a kind of exocrine glands and a dynamic organ.Structure of mammary gland changes throughout the female reproductive cycles.Development of mammary gland occurs in the defined stages that are closely linted to sexual development and reproduction, namely embryonic, prepubertal and pubertal stages, pregnancy, lactation and involution.In this review, the roles of epithelial-stromal (mesenchymal) interactions in embryonic and postnatal mammary development were summarized, elaborated the regulations of different kinds of hormones on the mammary development after pubertal stage, and described the discovery of mammary stem cell populations (MaSC) and selection markers of mice and human.The objective of this work was to learn the basic processes and potential regulation mechanisms of the mammary development to provide some help for the researchers in the field of mammary gland.     

意大利蜜蜂同日龄不同职能工蜂上颚腺的转录组学分析

为揭示意大利蜜蜂哺育蜂上颚腺中蜂王浆合成和分泌相关的分子机制,通过组建人工蜂群收集3日龄工蜂(3d)、10日龄哺育蜂(10dN)、10日龄采集蜂(10dF)、21日龄哺育蜂(21dN)和21日龄采集蜂(21dF),利用高效液相色谱技术检测5种不同职能工蜂上颚腺中10-羟基-2-癸烯酸(10-hydroxy-2(E)-decenoic acid,10-HDA)的含量,并在转录组学水平全面分析上颚腺中调控蜂王浆合成和分泌密切相关的基因。结果表明:工蜂上颚腺中10-HDA含量随日龄的增加呈逐渐增加趋势,其中21dF和21dN上颚腺中10-HDA的含量均显著高于3d(P0.05),但同日龄采集蜂上颚腺中10-HDA的含量高于相同日龄哺育蜂;RNA-seq分析发现,46个差异基因在10dN上颚腺中的表达量显著高于3d、10dF和21dF,同时在21dN上颚腺中的表达量也显著高于21dF;GO和KEGG富集分析显示这些差异基因主要富集在脂肪酸代谢、能量代谢等方面,暗示哺育蜂的上颚腺可能通过增加脂肪酸代谢和能量代谢等促进蜂王浆中相关脂肪酸的合成。综上,在排除日龄影响下,本研究测定了不同职能工蜂上颚腺中10-HDA的变化趋势,同时筛选了46个与哺育蜂上颚腺中蜂王浆合成和分泌密切相关的基因,为深入阐明其分子机制提供基础,也为研究膜翅目昆虫上颚腺的功能提供新视角。     

陆地棉色素腺体的表达及其遗传的特殊性

陆地棉种子及各部器官含有有毒物质棉酚,这种情况与棉株各部器官着生有色素腺体的状况有关联。研究结果表明:色素腺体在棉株各器官上的分布极具特殊性,有色素腺体棉与无色素腺体棉杂交后代,不同个体的不同器官上的色素腺体的分布具有多样性;色素腺体密度的不均匀性;色素腺体表达时期的不一致性;以及各种色素腺体类型模式出现频率的不规律性。色素腺体的遗传亦极具特殊性,难于用两对基因质量性状遗传或微效多基因数量性状遗传理论进行圆满解释。本研究倾向于维尔逊和斯密斯提出的“基因对不同器官上色素腺体的表达具有可变的表现度作用”的观点。根据本研究结果,对育种及良繁工作如何提高无色素腺体类型或高色素腺体类型的中选率提出了可减少误判的依据。     

Spontaneous adenolipoma of the mammary gland in the male F344 rat

A 110-week-old male F344 rat from the high-dose group of a 104-week carcinogenicity study, exhibited a spontaneously occurring subcutaneous mass in the left axilla extending to the chest. Histologically, the mass was well-demarcated from the adjacent mammary tissue and slightly encapsulated without evidence of infiltration into the surrounding tissues. The mass contained both epithelial and adipose components. The epithelial component consisted of ductal structures of various sizes lined by a single layer of flattened to cuboidal epithelial cells with relatively clear or vacuolated cytoplasm. These ductal structures were well-intermingled with an adipose component that consisted of a uniform monomorphic cell population of mature adipocytes. Both cell types were well-differentiated and did not exhibit cellular atypia. Within the mass, fibrous connective tissue was found in the stroma with infiltration of numerous mast cells. Based on these findings, the mass was diagnosed as an adenolipoma of the mammary gland.     

吸血蓖子硬蜱成虫唾腺莱姆病螺旋体重度感染的发现

为了解莱姆病螺旋体在蜱体内的发育生物学，采用直接免疫荧光试验、银染色法组织学及电子显微镜观察螺旋体，结果显示，感染莱姆病螺旋体的饥饿蓖子硬蜱雌虫未吸血与吸血0．5和1天唾腺中无螺旋体。在吸血开始后2天出现唾腺的轻度感染，3天出现唾腺的中度感染，4天和5天出现重度感染。这些结果表明，莱姆病螺旋体媒介蜱唾腺的感染程度随吸血时间的延长而迅速增高，并可在缓慢吸血期的中后期形成重度感染。莱姆病螺旋体在吸血期媒介唾腺内的大量存在，特别是重度感染的发现，为该病原螺旋体由蟀向脊椎动物宿主传播的唾液分泌途径假设提供了有力证据。本研究对莱姆病螺旋体在吸血蟀唾腺内分裂增殖的可能性进行了讨论。     

不同饲养模式对妊娠母猪行为、唾液皮质醇和淀粉酶水平的影响

本试验利用母猪行为以及唾液皮质醇和淀粉酶含量探索空间限制对母猪生理心理状态造成的影响。试验选择大白妊娠母猪64头,随机平均分成2组,分别采用限位栏(180 cm×60 cm×110 cm)和群养模式(568 cm×448 cm×50 cm)饲养,群养模式下每圈8头母猪,共4圈。于试验1、3、5、6、8、10、11、13、15周第1、2天分别采用10 min间隔扫描取样法记录母猪行为和采集试验母猪唾液样本,检测唾液皮质醇水平和唾液淀粉酶含量。结果表明:限位栏母猪表现无食咀嚼、啃栏、啃槽行为的次数显著高于群养母猪。限位栏母猪的唾液皮质醇和淀粉酶表现出相反的分泌趋势,无食咀嚼与唾液淀粉酶含量之间存在显著的正相关关系(r=0.336,P=0.048)。群养模式下试验母猪的唾液皮质醇水平、淀粉酶含量与无食咀嚼行为之间没有显著性相关的关系。